Медико-биологические микроскопы Nikon
Москва
+7 (495) 787 40 46
Санкт-Петербург
+7 (812) 305 06 06

Nikon N-STORM 5.0

Микроскопия сверхвысокого разрешения N-STORM (STochastic Optical Reconstruction Microscopy) основана на реконструкции изображения в сверхвысоком разрешении, на основании информации о точной локализации отдельных флуорохромов. Микроскоп N-STORM на базе инвертированного микроскопа Nikon Ti2-E с программным обеспечением NIS-Elements позволяет проводить многоцветную локализация в трех измерениях с высокой точностью, что обеспечивает получение изображения с разрешением до 20 нм (XY).

Ключевые особенности:

 

Улучшение разрешения в плоскости (XY) до 20 нм

Микроскоп N-STORM с помощью программного обеспечения NIS-Elements получает информацию  о точной локализации тысяч отдельных флуорофоров, расположенных в поле зрения, что позволяет реконструировать изображение с суперразрешением, которое в 10 раз больше, чем у обычных оптических микроскопов.

 

Раковые клетки шейки матки человека (HeLa S3),
помеченные Alexa Fluor® 647 (NUP153) и ATTO 488 (TPR)

Фотографии предоставлены: Dr. Michael W. Davidson,
National High Magnetic Field Laboratory, Florida State University

Улучшение осевого разрешения (по Z) до 50 нм

В микроскопе N-STORM используются запатентованные методы для десятикратного увеличения осевого разрешения, по сравнению с обычными оптическими микроскопами. Это позволяет после 3D реконструкцию получать 3D модели препарата в наномасштабе.

 
3D-изображение в режиме STORM тубулина в клетках BSC-1, помеченных Alexa Fluor® 647. Глубина изображения 4 мкм.

 

Сверхвысокое разрешение для живых препаратов

Скорость захвата изображений системы N-STORM 5.0 значительно улучшилось и составляет всего несколько секунд (в высокоскоростном режиме с областью захвата 20 мкм × 20 мкм) для одного снимка. Это стало возможным благодаря обновленной системе освещения и оптимизации захвата изображения с помощью камер sCMOS, что позволяет увеличить скорость съемки в 10 раз.

 

Скорость захвата изображений: 350 кадров в секунду 30-минутная съемка в режиме time-lapse с интервалом 1 мин

 

Возможность многоцветной визуализации

Многоцветное изображение со сверхвысоким разрешением может быть получено как с использованием пар активатор-репортер при последовательной активации, так и без активаторов при непрерывной активации. Это позволяет пользователям получить информацию не только о локализации, но и о взаимодействии нескольких белков на молекулярном уровне.

 

Двухцветное изображение микротрубочек (Alexa Fluor® 405-Alexa Fluor® 647) и митохондрий (Cy3-Alexa Fluor® 647) в режиме STORM

Объектив: CFI Plan Apochromat VC 100X Oil (NA 1.40)

 

 

 

Изображения высокой четкости и высокой плотности

Новый дизайн осветительной линзы в микроскопе N-STORM 5.0 позволил улучшить эффективность лазерного возбуждения и увеличить скорость захвата изображения, что привело к повышению плотности молекул на единицу площади и получению намного более четких изображений с большим количеством молекул.

 

Слева: изображение на системе N-STORM 5.0, справа: изображение на системе N-STORMпредыдущего поколения
Размер шкалы: 5 мкм
Образец: Тубулин в клетках BSC-1, помеченный Alexa Fluor® 647, время захвата: 20 секунд

 

Протокол окраски DNA-PAINT

Методика окраски DNA-PAINT для визуализации в режиме STORM обеспечивает уникальное решение, практически исключающее эффекты фотообесцвечивания - одиночные молекулы могут отображаться в течение нескольких дней или более в одном и том же образце без смены буфера и без существенного снижения количества локализованных молекул или их фотонов. Таким образом, этот метод идеально подходит для многоцветной и трехмерной съемки со сверхвысоким разрешением (обратите внимание, что метод не предназначен для съемки живых образцов).

 

 

Увеличение области захвата изображения

Использование зум-линз в системе формирования изображений позволило в 4 раза (до 80 мкм x 80 мкм) увеличить область препарата, наблюдаемую в режиме N-STORM

Слева: изображение на системе N-STORM 5.0, 80 мкм x 80 мкм
Справа: изображение на системе
N-STORM предыдущего поколения, 40 мкм x 40 мкм
Образец: митохондрии TOM20, конъюгированная с Alexa Fluor® 647

 

Совмещение различных методов оптической микроскопии

N-STORM может быть совмещен с системой конфокальной микроскопии, например Nikon A1+. При этом возникает возможность легко переключаться между конфокальным режимом и режимом сверхвысокого разрешения в рамках одного эксперимента.  

Спецификация

Режимы работы

2D-STORM (normal mode and continuous mode)

3D-STORM (normal mode and continuous mode)

Латеральное разрешение (XY)

До 20 нм

Аксиальное разрешение (Z)

До 50 нм

Максимальное поле зрения

80 мкм х 80 мкм

Многоцветные изображения

До 3 цветов

Совместимые комбинации лазеров

405 нм/488 нм/561 нм/647 нм,

405 нм/458 нм/488 нм/561 нм/647 нм,

405 нм/445 нм/488 нм/561 нм/647 нм

Детектор

Камера sCMOS ORCA-Flash 4.0 (Hamamatsu Photonics K.K.)

Совместимые объективы

CFI SR HP Plan Apochromat Lambda S 100XC Sil (NA 1.35)
CFI SR HP Apochromat TIRF 100XC Oil (NA 1.49)
CFI HP Apochromat TIRF 100XAC Oil (NA 1.49)
CFI HP Plan Apochromat VC 100X Oil (NA 1.40)

 

Развернуть
Вернуться наверх
Обратный звонок
Напишите нам