Конфокальный микроскоп Nikon A1+/А1R+ HD

Конфокальный микроскоп A1R HD, оснащен как сверхбыстрым резонансным, так и гальваническим сканерами высокого разрешения, что позволяет проводить эксперименты с одновременной фотоактивацией и визуализацией образца.

Захват высококачественных конфокальных изображений с ультравысокой скоростью и повышенной чувствительностью с помощью резонансного и гальванического сканеров делает Nikon A1R HD мощным инструментом для сбора информации о внутриклеточной динамике и межклеточных взаимодействиях.

Ключевые особенности:

Резонансный сканер высокой четкости (1024х1024)

Новый резонансный сканер Nikon, установленный в сканирующей голове A1R HD, обеспечивает получение  изображений с высокой скоростью и высокой четкостью. Широкий динамический диапазон и уменьшенный уровень шума поднимают планку качества изображения для резонансных сканеров на недостижимую ранее высоту.

Высокое разрешение

Новый резонансный сканер позволяет получать изображения с превосходной детализацией на максимальном разрешении 1024 x 1024 пикселей (15 кадр/сек). В сочетании с объективами Nikon высокого разрешения, A1R HD может достичь абсолютной оптической точности

Большое поле зрения

Благодаря разрешению 1024 x 1024 пикселей и большому полю зрения (FOV 18) новый резонансный сканер обеспечивает большую производительность при получении изображении для самых различных приложений

Высокая скорость

Высокая скорость захвата изображений резонансного сканера (до 420 кадр/сек) позволяет захватывать изображения с очень коротким временем выдержки, минимизируя время возбуждения и воздействие лазера на образец.

Многоканальная детекция

Возможна одновременная визуализация по 5 каналам: четырехканальный эпископический детектор и диаскопический детектор

 

Сравнение обзорного снимка с максимальным полем зрения и детализированного изображения тонких структур в просветленном образце 2мм среза мозга мыши   Изображение предоставлено: Drs. Ryosuke Kawakami, Kohei Otomo, and Tomoni Nemoto, Research Institute for Electronic Science, Hokkaido

 

 

 

 

  

Гибридный сканер для сверхбыстрой фотоактивации изображений

A1R HD имеет гибридную сканирующую головку, которая включает в себя как сверхвысокоскоростной резонансный сканер, так и гальванический сканер с высоким разрешением. Одновременная фотоактивация и сверхбыстрый захват изображения с использованием этих двух сканеров позволяют мгновенно визуализировать изменения после фотоактивации, а также позволяют наблюдать межмолекулярные взаимодействия.

Клетки HeLa, экспрессирующие белок  Yellow Cameleon 3.60, возбуждались лазером 457 нм. После стимуляции гистамином наблюдалась динамика концентрации ионов кальция. Интенсивности эмиссии CFP и YFP в выбранной области (ROI) показаны как зеленый и красный графики соответственно. Наряду с увеличением концентрации ионов кальция в клетке увеличивается межмолекулярная эффективность FRET между CFP и YFP, при этом интенсивность флуоресценции CFP уменьшается, а интенсивность флуоресценции YFP увеличивается. Возбуждение проводилось лазером 457 нм, размер изображения: 512 x 512 пикселей, скорость съемки 30 кадров в секунду (с резонансным сканером). Фотографиипредоставлены: Dr. Kenta Saito and Prof. Takeharu Nagai, Research Institute for Electronic Science, Hokkaido University

Схема гибридного сканера A1RHD

Использование гиперселектора позволяет гибко переключаться или одновременно использовать два сканера (резонансный и гальванический). 

 

  

 

Гальванический сканер высокого разрешения

Гальванический сканер A1R HD позволяет получать изображения с высоким разрешением до 4096 x 4096 пикселей. Кроме того, благодаря системам сканирования и выборки сканера, а также технологии коррекции изображения также возможно высокоскоростной захват изображения до 10 кадров в секунду (512 x 512 пикселей).

Изображение рыбки данио-рерио с четырьмя зондами (гальванический сканер) Ядра (синий): Hoechst33342, зрачок (зеленый): GFP, нерв (желтый): Alexa Fluor® 555, мышцы (красный): Alexa Fluor® 647

 

 

 

 

 

Быстрое и точное спектральное разделение: Спектральный детектор A1-DUS

Высокоскоростная спектральная визуализация

Скорость захвата 32-канального спектрального изображения (512 x 512 пикселей) составляет 0,6 секунды. Кроме того изображения с разрешением 512 x 32 пикселей могут быть захвачены со скоростью 24 кадра в секунду.

 

Точное и высокоскоростное разделение сигналов

Спектральный детектор A1-DUS обеспечивает точное разделение близко перекрывающихся спектров флуоресценции, а также дает возможность устранения сигналов автофлуоресценции. Превосходные алгоритмы и высокоскоростная обработка данных позволяют в режиме реального времени получать разделенные сигналы.

 

 

Актин, окрашенный Phalloidin-Alexa Fluor® 488 в клетках HeLa, экспрессирующих белок H2B-YFP

Слева: изображение до разделения сигналов; справа: изображение после разделения сигналов.
(зеленый: Alexa Fluor® 488, красный: YFP).
Изображения предоставлены: Dr. Yoshihiro Yoneda and Dr. Takuya Saiwaki, Faculty of Medicine, Osaka University

 

Широкополосная спектральная визуализация

Возможно одновременное возбуждение четырьмя лазерами (из восьми на выбор), что позволяет получать спектральные изображения в более широком диапазоне.

 

 

Функция V-фильтрации

Для каждого из 32-х каналов спектрального детектора A1-DUS возможно их объединение, с созданием более широких виртуальных каналов, которые в точности соответствуют спектрам испускания используемых флуорохромов.

 

 

Двухканальный спектральный детектор GaAsP A1-DUVB

Получение высокочувствительного спектрального изображения

С помощью GaAsP PMT перестраиваемый эмиссионный детектор A1-DUVB обеспечивает гибкое обнаружение флуоресцентных сигналов с высокой чувствительностью как в режиме гальвано-, так и в режиме резонансного сканирования.

Перестраиваемый диапазон детекции

Пользователь может самостоятельно устанавливать спектральный диапазон детекции A1-DU с шириной вплоть до 10 нм. Спектральные изображения образцов с несколькими флуоресцентными метками могут быть получены путем захвата серии спектральных изображений с последовательным изменением диапазона детекции

Клетки HeLa с пятью флуоресцентными метками, ядра: DAPI, виментин: Alexa Fluor® 488, ламин: Alexa Fluor® 568, тубулин: Alexa Fluor® 594, актин: Alexa Fluor® 633 Изображение снято с помощью детектора A1-DUVB Изображения предоставлены: Dr. Tadashi Karashima, Department of Dermatology, Kurume University School

 

Мультидетектор GaAsP A1-DUG-2

ФЭУ GaAsP обеспечивает более высокую чувствительность, чем обычный ФЭУ, что обеспечивает итоговую квантовую эффективность до 45%.

Nikon разработал мультидетектор A1-DUG-2 с двумя обычными и двумя GaAsP ФЭУ.

Более высокая чувствительность GaAsP ФЭУ позволяет получить более яркие сигналы с минимальным фоновым шумом, что делает возможным наблюдение флуорохромов  даже со слабой флуоресценцией, которую до сих пор было трудно обнаружить. 

 

Простое использование сложных приложений

Программное обеспечение NIS-Elements C с простым и интуитивно понятным интерфейсом позволяет интегрировать управление конфокальной системой, микроскопом и периферийных устройств. 

 

 

Конфокальный микроскоп Nikon A1R HD может быть совмещен с системами сверхвысокого разрешения
N-STORM/N-SIM, модулем TIRF, системой автоматического поддержания фокуса PFS. Управление всеми система при этом осуществляется из единой программной оболочки NIS-Elements.

 

 

 

Конфокальный микроскоп NikonA1RHDс системой сверхвысокого разрешения N-SIM